Reagen Deteksi PCR Real-Time Beku-Kering untuk Deteksi Listeria monocytogenes yang Sangat Sensitif tanpa Rantai Dingin

LyoDt^®PCR Real-Time Dingin beku Reagen deteksi untuk Listeria monocytogenes

Penggunaan️S Manual

1.Deskripsi

Listeria monocytogenes,Gram-positive small bacillus, adalah patogen zoonotik yang terutama ditularkan melalui saluran fecal-oral. Selain itu, dapat masuk ke tubuh melalui kontak mata atau kulit / selaput lendir yang rusak.Infeksi biasanya berupa septikemia, meningitis, dan monositosis.

Produk ini adalah reagen PCR real-time beku keringuntuk deteksiListeria monocytogenes. Ini menggunakan yang sangat terpelihara HlyA gen dariListeria monocytogenes sebagai target deteksi. Ini adalah campuran utama yang mengandung semua bahan yang diperlukan, kecuali DNA templat, dan sudah disebar sebagai tes tunggal dalam tabung PCR untuk penggunaan yang mudah.Produk ini tidak memerlukan rantai dingin untuk transportasi dan penyimpanan, yang secara signifikan mengurangi biaya pengiriman, dan menghilangkan kemungkinan kerugian akibat limbah reagen dan kontaminasi aerosol.

2. Spesifikasi & Komposisi

3. Penyimpanan Dan jangka waktu

Simpanpada suhu sekitar (5-30°C). Hal ini stabil hingga 12 bulan. Setelah pembungkus vakum dibuka, simpan produk yang tidak digunakan di kantong plastik yang disertakan dengan desiccants.dandalam kantong aluminium foil. 

Perhatian: 

Pellet reagen yang semakin kecil adalah indikasi kelembaban yang meresap ke tabung dan reagen menjadi lembab.Setiap reagen dengan ukuran pelet yang jauh lebih kecil dari biasanya harus dibuang atau diuji dengan kontrol positif sebelum digunakan. untuk pengujian sampel.

4Perlengkapan tambahan dan reagen diperlukan.

1)Instrumen PCR real-time

2)PipEttesdan tip

3)Nuklease-air bebas

4)Kit ekstraksi asam nukleat

5. Kompatibel real-time PCR sistem

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6. SPECIMEN yang dapat diterima

Sup pengayaan makanan, muntah, sampel diare, dll.

7. Prosedur Operasi

1)NuklirACIDEpenarikan

EkstrakDNAdari spesimen menggunakan kit ekstraksi yang tepat.Disarankan bahwaDNAdieluasi dengan sekitar 100μl buffer eluasi(TE atauH bebas nuklease₂O)di langkah terakhir dariekstraksi.Asam nukleat yang dimurnikan harus segera digunakan atau disimpan pada suhu -20°C.

2)Persiapan Kontrol Positif

Kontrol positif dapat disimpan pada suhu sekitar sebelum rehidrasi hingga 12 bulan.Ituharus direhidrasi sebelum digunakandengan menambahkan250μldari buffer TE atau nuclease-freeH₂Oh,Digunakan segera atau simpanpada -20°C.

3)PCR Waktu NyataMIXPganti rugi

A) Buka paket vakum dan keluar strip 8-tubesPeriksa pelet berada di bagian bawah tabung (Potong jumlah tabung sesuai kebutuhan Jikadiperlukan)Jika tabung yang disediakan tidak kompatibel dengan instrumen Anda, pindahkan pelet reagen ke tabung optik yang kompatibel dengan instrumen Anda.

B) Buka tabung dan buang tutupnya (tidak cocok untuk mesin PCR real-time), dan persiapkan campuran reaksi pada es seperti di bawah ini.

* Air bebas nuklease dapat digunakan sebagai kontrol negatif.

C)Tutup PCR dengan menggunakan tutup (iris) yang cocok untuk PCR real-time(tidak diberikan).

D) Vortex tabung pada kecepatan rendah selama 10 ~ 15 detik, dan sentrifugasi pada 3000rpm selama 20 detik dan menempatkan mereka dalam instrumen PCR real-time.

4)Pengaturan RT-PCR

Atur volume reaksi menjadi 25μl, dan prosedur amplifikasi PCR sebagai berikut. fluoresensi pada 60°C, dan pilih NONE sebagai referensi pasif.

5)HasilAanalisadanAkuPengertian