LyoDt® Real-Time PCR Detection kit untuk Salmonella Freeze-Dried powder

LyoDt® Real-Time PCR Detection kit untuk Salmonella Freeze-Dried powder

1.Pengantar

Salmonellaadalah enterobakteri Gram-negatif dan patogen makanan yang umum. Bakteri ini tersebar luas di alam dan sering mengkolonisasi usus manusia dan hewan, terutama unggas,ternak, dan hewan peliharaan.Salmonellakontaminasi meliputi: daging dan produk daging, telur dan produk telur, susu dan produk susu, dll.

Produk ini adalah reagen PCR real-time beku kering untuk deteksiSalmonella. Ini menggunakan gen invA yang sangat terkonservasi dariSalmonellaIni adalah campuran utama yang mengandung semua bahan yang diperlukan, kecuali DNA templat, dan sudah didistribusikan sebagai tes tunggal dalam tabung PCR untuk penggunaan yang mudah.Produk ini tidak memerlukan rantai dingin untuk transportasi dan penyimpanan, yang secara signifikan mengurangi biaya pengiriman, dan menghilangkan kemungkinan kerugian akibat limbah reagen dan kontaminasi aerosol.

2. Spesifikasi & Komposisi

3. Penyimpanan Dan jangka waktu

Simpan pada suhu sekitar (5-30°C). Ini stabil hingga 12 bulan. Setelah pembungkus vakum dibuka, simpan produk yang tidak digunakan dalam kantong plastik yang dapat disegel kembali dengan pengering,dan dalam kantong aluminium foil.

Perhatian:

Pellet reagen yang semakin kecil adalah indikasi kelembaban yang meresap ke tabung dan reagen menjadi lembab.Setiap reagen dengan ukuran pelet yang jauh lebih kecil dari biasanya harus dibuang atau diuji dengan kontrol positif sebelum digunakanuntuk pengujian sampel.

4Perlengkapan tambahan dan reagen diperlukan.

1) Instrumen PCR real-time

2) Pipet dan tip

3) Air bebas nukleasa

4) Kit ekstraksi asam nukleat

5. Kompatibel real-time PCR sistem

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6. SPECIMEN yang dapat diterima

Sup pengayaan makanan, muntah, sampel diare, dll.

7. Prosedur Operasi

1) Ekstraksi asam nukleat

Ekstrak DNA dari sampel menggunakan kit ekstraksi yang tepat.Disarankan bahwaDNAdieluasi dengan sekitar 100μl buffer eluasi(TEatauH bebas nuklease₂O)di langkah terakhir dariekstraksi.Asam nukleat yang dimurnikan harus segera digunakan atau disimpan pada suhu -20°C.

2) Persiapan Kontrol Positif

Kontrol positif dapat disimpan pada suhu sekitar sebelum rehidrasi selama 12 bulan.₂O, berputar pada kecepatan rendah selama 15-20 detik, dan disentrifikasi pada kecepatan rendah selama 15-20 detik.

3) Persiapan Campuran PCR Real-Time

A) Buka bungkus vakum dan keluarkan strip 8 tabung yang berisi reagen. periksa pelet berada di bagian bawah tabung (potong jumlah tabung yang diperlukan jika diperlukan).Jika tabung yang disediakan tidak kompatibel dengan instrumen Anda, pindahkan pelet reagen ke tabung optik yang kompatibel dengan instrumen Anda.

B) Buka tabung dan buang tutupnya (tidak cocok untuk mesin PCR real-time), dan persiapkan campuran reaksi pada es seperti di bawah ini.

* Air bebas nuklease dapat digunakan sebagai kontrol negatif.

C) Tutup PCR dengan menggunakan tutup (garis) yang cocok untuk PCR waktu nyata (tidak disediakan).

D) Vortex tabung pada kecepatan rendah selama 10 ~ 15 detik, dan sentrifugasi pada 3000rpm selama 20 detik dan menempatkan mereka dalam instrumen PCR real-time.

2) Pengaturan RT-PCR

Atur volume reaksi menjadi 25μl, dan prosedur amplifikasi PCR sebagai berikut.

3) Analisis dan Interpretasi Hasil